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抗菌肽與抗生素相比,具有不同于抗生素的特性。例如,抗菌肽不易產生耐藥性??股?,如四環素,主要通過受體Tet蛋白的結合進入細菌,抗菌肽作用于細菌,而不是通過特定的受體,而是通過直接破膜機制殺死細菌??咕牟灰桩a生耐藥性,而且具有較高的水溶性和熱穩定性。
蛋白酶中的穩定性
抗菌肽在蛋白酶穩定性方面,研究表明,一些抗菌肽具有抵抗胰蛋白酶和胃蛋白酶水解的能力,不同的蛋白酶有不同的酶切位點。設計抗菌肽的特定分子結構,避免酶切位點,減少抗菌肽水解也是一種設計策略。研究發現,木瓜蛋白酶處理不同的抗菌肽后,KR-32活性無明顯變化,其他抗菌肽PG-1,LL-37和C-BF略有降低了抗菌活性,沒有顯著變化。胰蛋白酶處理后,四種抗菌肽的活性不同程度地降低,這可能與胰蛋白酶的特異性有關。其水解點是賴氨酸或精氨酸羧基肽鍵。這四種抗菌肽含有多種精氨酸,這可能是胰蛋白酶能降低四種抗菌肽抗菌活性的原因。具體機制需要進一步研究。
鹽溶液中的穩定性
在鹽溶液穩定性研究中,研究發現抗菌肽Clavanina在低pH和高濃度鹽溶液(Nacl和MgCl2)中具有較高的生物活性,這可能與Clavanina富含組氨酸和α-螺旋有關。同時,研究發現,當NaCl濃度分別為50mM和200mM時,人類防御素HBD-1和HBD-3的抗菌活性明顯受到抑制,這可能與防御素N-端?;葸哙ざ擞嘘P??咕牡姆€定性在一定程度上受到二次結構和氨基酸組成的影響。為了進一步評價抗菌肽KR-32的穩定性,在不同鹽離子和蛋白酶的環境中選擇抗菌肽,通過測定不同處理后抗菌肽對指示菌大腸桿菌K88的抗菌活性來判斷抗菌肽在不同環境中的穩定性。KR-32在50mm氯化鈉濃度下仍具有較好的抑菌活性,在150mm高濃度下完全失去抑菌活性,另外三種抗菌肽PG-1,LL-37,C-BF在高濃度下抑菌活性明顯下降,MgCl2濃度不同(0.5mM,1mM,2mM)下抗菌肽KR-32殺菌率均在75%以上,保持良好的穩定性,LL-37、PG-1和C-BF隨濃度的增加而不同程度地降低,說明LL-37、PG-1與C-BF對鎂離子敏感性較高,相比,KR-32對鎂離子和鈉離子的敏感性較低。
高溫環境中的穩定性
在100℃的高溫環境下,蛋白質的空間結構(包括二級結構和三級結構等。)將被破壞,一級結構(氨基酸殘基序列即肽鍵)依然完整??咕淖鳛橐环N小肽物質,其分子結構相對簡單,主要依靠一級結構中特定的氨基酸殘基序列來發揮抗菌活性。
抗菌肽在食品或飼料添加劑中的應用
抗菌肽作為食品或飼料添加劑的應用也越來越多地被提及,在食品或飼料加工過程中,可能會遇到高溫處理等工序,因此抗菌肽的熱穩定性非常重要。Ma等人研究表明,抗菌肽HFU3和HFU4在100℃高溫下處理1h后,對大腸桿菌的MIC值分別為8μM和4μM,結果與對照組(未經處理的HFU3和HFU4)一致。Zhang等人發現,抗菌肽plectasin在100℃處理1小時后,對金黃色葡萄球菌的抑菌圈直徑為對照組的50%,表明抗菌肽plectasin仍保持良好的抑菌活性。此外,Zhao等人發現,高溫處理15分鐘后,BL-A60的抗菌肽活性達到90%。在機制方面,研究表明,抗菌肽的抑菌活性與其特定的氨基酸序列有關。例如,抗菌肽cecropin A氨基末端的1-8個氨基酸與抗菌肽magagainin2的1-12個氨基酸拼接雜合。含有20種氨基酸的雜合肽CAMA具有較高的抗菌活性,不表現出高細胞毒性。此外,還報道了抗菌肽的熱穩定性與二硫鍵和空間結構有關。N或C末端的賴氨酸也是提高抗菌肽熱穩定性的因素之一。
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